描述：大鼠Ki-67蛋白（Ki67P）ELISA試劑盒操作簡單、結(jié)果精確，臻科生物從業(yè)多年一直專心致力于免疫學(xué)技術(shù)的積累與發(fā)展，以其優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品質(zhì)量與專業(yè)的技術(shù)服務(wù)，贏得業(yè)內(nèi)廣大人士的認可。我司也一直和國內(nèi)外眾多高等院校與科研單位保持良好的合作關(guān)系，共同努力合作共贏。
一、大鼠Ki-67蛋白(Ki67P)ELISA試劑盒詳細介紹
中文名稱:大鼠Ki-67蛋白(Ki67P)ELISA試劑盒
規(guī)格: 48T /96T
品牌:臻科生物
種屬:大鼠ELISA試劑盒
檢測波長:450 nm
所需樣本體積: 50ul
適用范圍:僅供科研，不得用于臨床診斷。
保存及有效期:2-8℃，六個月
檢測樣本種類:用于測定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本的含量或者表達。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。
臻科生物供應(yīng)的種屬有：人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、人、豬牛羊、雞鴨鵝、植物ELISA試劑盒等
二、實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠Ki-67蛋白(Ki67P)水平。用純化的大鼠Ki-67蛋白(Ki67P)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加大鼠Ki-67蛋白(Ki67P)，再與HRP 標(biāo)記的白介素20(IL-20)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白介素20(IL-20)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD 值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中大鼠Ki-67蛋白(Ki67P)濃度。
三、試劑盒組成
1 | 30 倍濃縮洗滌液 | 20ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標(biāo)試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標(biāo)準(zhǔn)品（240 pmol/L） | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個 |
四、操作步驟
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
5號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
4號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
3號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
2號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
1號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7.溫育：操作同3。
8.洗滌：操作同5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.
10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.測定：以空白孔調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
五、試劑盒計算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD 值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的
OD 值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD 值計算出標(biāo)
準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD 值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，
即為樣品的實際濃度。
六、注意事項
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未
用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。
3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間
控制在5 分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4．請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD 值
大于標(biāo)準(zhǔn)品孔di一孔的OD 值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n 倍）后再測定，計
算時請后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物請避光保存。
7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
七．特別提醒
1.標(biāo)本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含NaN3 的樣品，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
八．更多優(yōu)勢產(chǎn)品
ZK-03771 大鼠Ki-67蛋白(Ki67P)ELISA試劑盒
ZK-03772 大鼠Janus激酶3(JAK3)ELISA試劑盒
ZK-03773 大鼠Janus激酶2(JAK2)ELISA試劑盒
ZK-03774 大鼠GATA結(jié)合蛋白2(GATA2)ELISA試劑盒
ZK-03775 大鼠E選擇素(SELE)ELISA試劑盒
ZK-03776 大鼠Endoglin蛋白(ENG)ELISA試劑盒
ZK-03777 大鼠E1A結(jié)合蛋白P300(EP300)ELISA試劑盒
ZK-03778 大鼠D-二聚體(D2D)ELISA試劑盒
ZK-03779 大鼠Discs大同源物4(DLG4)ELISA試劑盒
ZK-03780 大鼠Disabled同源物1(DAB1)ELISA試劑盒
ZK-03781 大鼠Dickkopf相關(guān)蛋白3(DKK3)ELISA試劑盒
ZK-03782 大鼠Dickkopf相關(guān)蛋白1(DKK1)ELISA試劑盒
ZK-03783 大鼠C組著色性干皮病偶聯(lián)因子(XPC)ELISA試劑盒
ZK-03784 大鼠C-型鈉尿肽(CNP)ELISA試劑盒
ZK-03785 大鼠C-肽(C-Peptide)ELISA試劑盒
ZK-03786 大鼠CD83分子(CD83)ELISA試劑盒
ZK-03787 大鼠CD40配體(CD40L)ELISA試劑盒
ZK-03788 大鼠CD3d分子(CD3d)ELISA試劑盒
ZK-03789 大鼠CD320分子(CD320)ELISA試劑盒
ZK-03790 大鼠CD30配體(CD30L)ELISA試劑盒
ZK-03791 大鼠CD14分子(CD14)ELISA試劑盒
ZK-03792 大鼠CCAAT增強子結(jié)合蛋白β(CEBPβ)ELISA試劑盒
ZK-03793 大鼠cAMP應(yīng)答元件結(jié)合蛋白(CREB)ELISA試劑盒
ZK-03794 大鼠C4結(jié)合蛋白α(C4BPα)ELISA試劑盒
ZK-03795 大鼠B-細胞淋巴瘤因子2(Bcl2)ELISA試劑盒
ZK-03796 大鼠B-細胞激活因子(BAFF)ELISA試劑盒
ZK-03797 大鼠B-淋巴細胞趨化因子1(BLC1)ELISA試劑盒
ZK-03798 大鼠B-淋巴細胞激活抗原B7-2(LAB7-2)ELISA試劑盒
ZK-03799 大鼠BH3相互作用域死亡激動劑(Bid)ELISA試劑盒
ZK-03800 大鼠Bcl2關(guān)聯(lián)X蛋白(Bax)ELISA試劑盒
ZK-03801 大鼠Bcl2/腺病毒E1B相互作用蛋白3(BNIP3)ELISA試劑盒
ZK-03802 大鼠Apelin受體(APLNR)ELISA試劑盒
ZK-03803 大鼠Apelin蛋白(APLN)ELISA試劑盒
ZK-03804 大鼠Apelin大鼠13蛋白(AP13)ELISA試劑盒
ZK-03805 大鼠AMP激活蛋白激酶β1(PRKAβ1)ELISA試劑盒
ZK-03806 大鼠AMPA離子能谷氨酸受體1(GRIA1)ELISA試劑盒
ZK-03807 大鼠Ⅹ型膠原(COL10)ELISA試劑盒
ZK-03808 大鼠Ⅸ型膠原α1(COL9α1)ELISA試劑盒
ZK-03809 大鼠Ⅵ型膠原α1(COL6α1)ELISA試劑盒
ZK-03810 大鼠Ⅳ型膠原α1(COL4α1)ELISA試劑盒
ZK-03811 大鼠Ⅳ型膠原(COL4)ELISA試劑盒
ZK-03812 大鼠Ⅲ型前膠原氨基端原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒
ZK-03813 大鼠Ⅲ型前膠原(PCⅢ)ELISA試劑盒
